上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    NM4-64神经元荧光探针
    物品单位 价格 品牌
    2000 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:1 mg
    • 货号:XK4072
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK4072
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 1 mg
    是否进口

    NM4-64神经元荧光探针 产品说明书 
    NM4-64神经元荧光探针 
    产品货号:XK4072
    产品规格:1 mg 
    应用范围:神经荧光染料 
    产品参数 
    外观:可溶于水的紫色固体 
    Ex/Em:543/- nm, (emission in MeOH is too weak to measure) 
    Ex/Em:510/750 nm (in membranes)   
    分子式:C29H45N4Cl3 
    分子量:555.5 
    储存条件 
    -20℃避光保存,有效期见外包装。 
    产品介绍 
    神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用
    于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有
    亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。神经
    末梢染料被命名为 NerveRed 或 NerveGreen 后接一个碳数,
    表示亲脂性尾巴的长度。NM 染料具有相似的结构,此外,
    它们在带正电的头部具有醛固定胺。 
    阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡
    来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分
    没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。
    神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因
    此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成
    的囊泡的数量的多少。反之,在胞吐作用时,染料与神经递
    质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的
    变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光
    增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率
    ——“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性
    尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,因此具有较
    高的结合速率和较低的解离速率。 
    本产品等同于 AM4-64,NM4-64 染料能用于固定细胞
    染色。 
    实验操作 
    以下是在盖玻片上对培养的神经元细胞的神经末梢染
    色,然后进行固定和免疫染色的方案。   
    神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞
    囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜;  在室温或
    37℃下,染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用台氏
    液液或其它缓冲液,可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒
    素(TTX),其目的是阻断动作电位并防止染色后的突触囊
    泡释放。用于特定实验的 方案需要由实验者摸索。   
    1.  在 50 mM  台氏液中稀释神经末梢染料至最终浓度为 4 
    μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min,使
    细胞完全浸没。 
    2.  将盖玻片转移至台氏液  + 0.5 μM 河豚毒素(TTX)溶液
    中,室温下孵育 1 min。 
    3.  室温下,用台氏液  + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻
    片。 
    4.  固定。将盖玻片用4%多聚甲醛,室温固定 20 min。 
    5.  将盖玻片直接转移至预冷的含0.01%Triton X-100的PBS
    中,4℃放置 10 min。 
    6.  预冷的PBS 洗三次,每次1 min。 
    7.  在含有一抗的10%的血清/PBS 中,4℃染色3 h。抗体浓 
     度应该为常规免疫荧光染色的两倍。 
    8.  预冷的PBS 洗三次,每次1 min。 
    9.  在含有二抗的2%的血清/PBS 中,4℃染色40 min。抗体
    浓度与常规免疫荧光染色的相同即可。 
    10.  预冷的PBS 洗三次,每次1 min。 
    11.  荧光显微镜下拍照观察。 
    图. NM4-64 在脂质体中的吸收和发射光谱

    本产品仅用于科研

    NM4-64神经元荧光探针