上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    牛羊口蹄疫O型抗体ELISA检测试剂盒(阻断法)
    • 品牌:xuanke
    • 产地:国产/进口
    • 货号:XK-SJH-0002
    • 价格: ¥1200/盒
    • 发布日期: 2020-06-18
    • 更新日期: 2023-12-11
    产品详请
    产地 国产/进口
    保存条件 2-8℃
    品牌 xuanke
    货号 XK-SJH-0002
    检测方法 酶联免疫法
    保质期 6个月
    规格 96T/96T*2/96*5
    检测限 详见说明书
    数量 68
    用途范围 定性定量科学研究
    标记物 HRP
    纯度 详询%
    样本 血清、血浆、组织液、组织匀浆等液体样本
    应用 科研

    牛羊口蹄疫O型抗体ELISA检测试剂盒(阻断法)使用说明书

    【产品名称】

    通用名:牛羊口蹄疫O型抗体ELISA检测试剂盒(阻断法)

    英文名:Test Kit for Antibodies to Bovine and sheep Foot and Mouth Disease Virus O (ELISA)

    【包装规格】

    96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

    【预期用途】

    口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。

    本试剂用于检测牛羊血清中口蹄疫病毒O型抗体,可用于口蹄疫病毒O型疫苗免疫效果评价。

    【原    理】

    本试剂盒由预包被口蹄疫病毒O型抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测牛羊血清样本中口蹄疫病毒O型抗体。实验时在酶标板中加入待检样本和抗体工作液,经温育后洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,若样品中含有口蹄疫病毒O型抗体则将阻断抗体工作液与酶标板上抗原结合,从而使后续反应不出现显色;反之则出现显色;显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值, 即可知样品是否含有口蹄疫病毒O型抗体。

    【储存及有效期】

    2~8℃保存,有效期12个月。包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。

    【适用仪器】

    含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。

    【样品准备】

    1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。

    2.待检血清样本恢复室温、混匀待用。阴、阳性对照不用稀释。

    3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。

    【检验方法】

    1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

    2.取所需用量酶标板条,设阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

    3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl;样品孔每孔先加入45μl工作洗涤液,再加入5μl血清样本(稀释比例为1:10)。

    4.每孔加抗体工作液50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃(推荐水浴)避光反应30分钟。

    5.甩去孔内液体,每孔加350 ul工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,*一次拍干。

    6.每孔加酶标记物100μl,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。

    7.洗涤,同步骤5。

    8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应15分钟。

    9.每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

    【参考值】

    实验正常的情况下,阴性对照吸光值≥0.8,阳性对照吸光值≤阴性对照吸光值×50%。

    【检验结果的解释】

    1.PI(阻断率)=(1-样本值/阴性对照孔均值)×100%,PI≥50%为阳性;PI<50%为阴性。

    2.本实验结果为阴性时表明抗体水平不足,建议补打相应疫苗。

    【试验方法的局限性】

    该试验仅作为定性检测牛羊血清中口蹄疫病毒O型抗体,根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

    【注意事项】

    1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

    2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

    3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

    4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。

    5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

    6.用于检测的样品应保持新鲜。

    7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

    8.不同批号试剂组分不得混用。