上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    DiOC2(3)膜电位荧光探针
    物品单位 价格 品牌
    280 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:20 mg
    • 货号:XK4027
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK4027
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 20 mg
    是否进口

    DiOC2(3)膜电位荧光探针 产品说明书 
    DiOC2(3)膜电位荧光探针   
    产品货号:XK4027
    产品规格:20 mg 
    应用范围:膜电位染色 
     产品参数 
    外观:可溶于 DMSO 或 DMF的橘红色固体 
    Ex/Em (MeOH):482/497 nm 
    CAS 号:905-96-4 
    分子式:C21H21IN2O2 
    分子量:460.31 
    分子结构图: 
     
    储存条件 
    -20℃  避光保存,有效期见外包装。 
     产品介绍 
    DiOC2(3) (3,3′-Diethyloxacarbocyanine,  碘化物)是一种
    广泛应用的膜电位探针。如用于线粒体膜电位的研究,
    DiOC2(3)能够穿透真核细胞的细胞质,在浓度低于 100 nM
    时,染料在具有活跃膜电位的线粒体中积累,形成红色荧光
    聚集体,当使用破坏线粒体膜电位的(如 CCCP)处理细胞
    时,DiOC2(3)染色强度降低。 
    DiOC2(3)染色的细胞可以通过流式细胞仪的蓝色激发,
    绿色和红色发射可视化。该试剂可与其他试剂搭配使用,例
    如红色激发的 Annexin V–APC,用于活力和凋亡的研究。 
    使用方法(线粒体膜电位检测) 
    1. DiOC2(3) 标记细胞 
    由于细胞类型、培养条件的差异以及应用方向的不同,
    建议起始浓度 50 nM 摸索 染色条件。 
    将  DiOC2(3)溶于无水 DMSO配制成 100 mM 的储液:
    向管中加入 435 μL的无水 DMSO,充分溶解。每次实验前,
    需将储液充分涡旋混匀。 
    开始实验前,将 DiOC2(3)  和  CCCP  恢复至室温。 
    (1)用预热的培养基、磷酸盐缓冲液或其他缓冲液重悬细
    胞,使细胞最终密度为 1×106个/mL。 
    (2)设置对照,向管中加入 1 μL CCCP 溶液至终浓度为 50 
    μM,37℃孵育 5 min。 
    注:CCCP 可以和 DiOC2(3)同时添加。为了获得不同细胞
    类型的 效果,可能需要滴定  CCCP。 
    (3)配置合适浓度的 DiOC2(3)工作液,加入工作液至终浓
    度为 50 nM,37℃  孵育15-30 min。如果进行其他标记,如
    用 Annexin V 结合物标记,请执行步骤 2.(1);如果不需要其
    他染色,请继续执行以下步骤。 
    (4)(可选)清洗细胞一次,向每个细胞管中加入适量预
    热的PBS 缓冲液。 
    (5)1000 rpm离心 5 min 
    (6)向每个管中加入 500 μL PBS 缓冲液,轻弹管壁使其重
    悬。 
    (7)使用 YF488 染料的发射滤光片在 488 nm激发下进行
    流式分析。用 CCCP 处理的样品调节补偿。 
    2. Annexin V结合物额外标记 
    可以用额外的标记方法检测  DiOC2(3)  染色后细胞的
    凋亡及生存状态。如用 Annexin V–APC  标记: 
    (1) 向步骤1.(3)的细胞中加入适量预热的PBS 缓冲液洗涤
    细胞一次。 
    (2) 1000 rpm离心 5 min,然后重悬于 100 μL 1×Annexin  结
    合缓冲液中。 
    (3)加入 5 μL Annexin V 结合物(如  Annexin V–APC)。 
    (4)37℃孵育 15 min。 
    (5)加入 400 μL Annexin  结合缓冲液。 
    (6) 用适合于YF488/PI和YF633染料的发射滤光片488 nm
    和 633 nm激发下进行流式分析。 
     注意事项 
    1.  荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧
    光淬灭。 
    2.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    本产品仅用于科研

    DiOC2(3)膜电位荧光探针