上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚-胺酯)
    物品单位 价格 品牌
    320 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:5 mg
    • 货号:XK4070
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK4070
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 5 mg
    是否进口

    5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚-胺酯) 产品说明书 
    5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚-胺酯) 
    产品货号:XK4070
    产品规格:5 mg 
    应用范围:细胞成像、细胞增殖和功能、细胞示踪、细胞计数 
     产品参数 
    外观:可溶于 DMSO 的白色或浅黄色固体 
    CAS 号:150347-59-4 
    Ex/Em:494/521 nm(pH=7) 
    分子式:C29H19NO11 
    分子量:557.47 
    细胞标记机制: 
     
     储存条件 
    -20℃避光保存,有效期见外包装。 
     产品介绍 
    5(6)-CFDA, SE 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞
    示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪
    细胞在体内的分裂增殖过程。 
    5(6)-CFDA, SE 是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate,
    FDA)的衍生物,具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光
    性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,被胞浆内的
    酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein 
    succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿
    透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE 还可自发并不可逆
    地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量
    且未被偶联的5(6)-CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养
    基内,被后续清洗步骤所清除。经 5(6)-CFDA, SE 标记的非
    分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此
    非常适用于细胞群落分析。 
    5(6)-CFDA, SE 标记细胞的荧光非常均一,优于以前使
    用的其他细胞示踪荧光探针如 PKH 26,并且分裂后的子代
    细胞的荧光分配也很均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 
    标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代
    细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1 通道)根据荧光强度的
    不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2 的荧光强度),
    二次(1/4 的荧光强度),三次(1/8 的荧光强度),以及更
    多分裂次数的细胞。5(6)-CFDA, SE 可检测分裂次数多达八
    次甚至更多。经 5(6)-CFDA, SE 标记的细胞可用于体外和体
    内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。5(6)-
    CFDA, SE 最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维
    细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。  
    5(6)-CFDA, SE 标记细胞呈绿色荧光,除了流式细胞仪
    检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者
    用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。 
     使用方法(针对活细胞染色的推荐步骤,可根据实际情
    况进行适当调整) 
    注:5(6)-CFDA, SE 与胺基反应,所以实验过程中不可使用
    含胺的缓冲液。 
     1.  开盖前使其恢复至室温,然后用 DMSO 制备 10 mM 的 
    5(6)-CFDA, SE 储液。用PBS 或适当的缓冲液稀释成 0.5~25 
    μM的5(6)-CFDA, SE工作液(稀释后的工作液要及时使用)。
    注:若进行较长时间的染色或细胞分裂较快,建议工作浓度
    为 5-10 μM,否则建议工作浓度为 0.5-5 μM。最适工作浓度
    因细胞不同而异,建议在一个范围内进行摸索。 
    2.  离心收集细胞,用 37℃预热的 5(6)-CFDA, SE 工作液重
    悬细胞。 
    3.  在37℃培养细胞 15~30 min。 
    4.  用 PBS 或适当的缓冲液洗涤细胞两次,用流式细胞仪
    (FL1/BL1 通道)或荧光显微镜观察细胞。 
    以下为可选步骤(若后续需要进行抗体标记,可进行固定和
    透化): 
    5.  固定。可使用3.7%的多聚甲醛室温固定 15 min。 
    6.  透化。冰丙酮中透化 10 min。固定和透化后,细胞需要
    用PBS 清洗。 
     注意事项 
    1. 5(6)-CFDA, SE 与胺基反应,所以实验过程中不可使用含
    胺的缓冲液。 
    2.  荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光
    淬灭。 
    3.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    本产品仅用于科研 
    5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯)