Hoechst 33342活细胞 DNA染料 产品说明书 
Hoechst 33342活细胞 DNA染料 
产品货号：XK4047
产品规格：10 mg 
应用范围：核酸染色 
 产品参数 
外观：可溶于水的黄色固体 
Ex/Em（结合 DNA）= 350/461 nm 
Ex/Em（未结合 DNA）= 346/460 nm 
CAS 号：23491-52-3 
分子式：C27H28N6O?3HCl?3H2O 
分子量：615.99 
分子结构图： 
 储存条件 
-20℃避光保存，有效期见外包装。 
 
产品介绍 
Hoechst 33342，也称bisBenzimide H33342或HOE 33342，
是一种非嵌入性的亮蓝色荧光染料。染料在溶液中荧光较弱，
但在 AT 序列富集区域的小沟处与 DNA 结合后荧光变得明
亮，故此类染料也被称为 DNA 探针。因背景较低，故染色
细胞不需洗涤步骤，且染色非常稳定，对活细胞无毒，结合
DNA 染色后可持续几天或更长时间。Hoechst 33342 与
Hoechst 33258 相比在水中的溶解度要低，但两种染料均具
有高细胞膜渗透性，被广泛用于细胞凋亡检测，染色后可用
荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。 
实验步骤 
1. 工作液配置 
（1）向 EP 管中加入 1 mL ddH2O 配置 10 mg/ml 储液。 
（2）用PBS 按照 1:2000 稀释Hoechst 33342 储液至终浓度
为 5 μg/mL的工作液。 
2. 染色 
（1）对于固定的细胞或组织 
a.  对于细胞或组织样品，固定后适当洗涤去除固定剂。如需
免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后
续步骤进行 Hoechst 33342 染色。 
b.  对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 Hoechst 33342 工作
液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待测染色样
品体积 3 倍的染色液，混匀。室温放置 3-5 min。 
c.  吸除 Hoechst 33342 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水
洗涤 2-3 次，每次 3-5 min。 
注：清洗步骤可选但不是必须的，清洗后不影响染色。 
d.  直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或
呈碎块状致密浓染。 
（2）对于活细胞或组织   
a.  加入适量Hoechst 33342工作液，充分覆盖待染色的样品，
通常对于六孔板每孔需加入 1 mL 的染色液，对于 96 孔板
每孔需加入 100 μL的染色液。 
b.  室温避光孵育10-20 min。 
c.  弃染色液，用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可进行荧光检
测。
    注：清洗步骤可选但不是必须的，清洗后不影响染色。  
注意事项   
1. Hoechst 染料通常用于染色哺乳动物细胞，但是也可以用
来染色死活细菌，染色死活细菌时推荐在 PBS 或 150 mM 
NaCl 中溶解为终浓度 12-15 μg/mL 的染色液室温染色 30 
min。对酵母的染色较弱。通常对于死细胞的染色要比活细
胞染色亮度高。 
2. Hoechst 33342 溶于水时溶解度可达 10 mg/mL，用于细胞
核染色时，推荐的Hoechst 33342工作浓度为0.5-10 μg/mL，
客户可根据实际染色情况对染色液浓度及染色时间上下摸
索。 
3.  荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成
检测。 
4.  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于科研 

Hoechst 33342活细胞 DNA染料