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      产品分类
    Hoechst 33342活细胞 DNA染料
    物品单位 价格 品牌
    200 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:10 mg
    • 货号:XK4047
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK4047
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 10 mg
    是否进口

    Hoechst 33342活细胞 DNA染料 产品说明书 
    Hoechst 33342活细胞 DNA染料 
    产品货号:XK4047
    产品规格:10 mg 
    应用范围:核酸染色 
     产品参数 
    外观:可溶于水的黄色固体 
    Ex/Em(结合 DNA)= 350/461 nm 
    Ex/Em(未结合 DNA)= 346/460 nm 
    CAS 号:23491-52-3 
    分子式:C27H28N6O?3HCl?3H2O 
    分子量:615.99 
    分子结构图: 
     储存条件 
    -20℃避光保存,有效期见外包装。 
     
    产品介绍 
    Hoechst 33342,也称bisBenzimide H33342或HOE 33342,
    是一种非嵌入性的亮蓝色荧光染料。染料在溶液中荧光较弱,
    但在 AT 序列富集区域的小沟处与 DNA 结合后荧光变得明
    亮,故此类染料也被称为 DNA 探针。因背景较低,故染色
    细胞不需洗涤步骤,且染色非常稳定,对活细胞无毒,结合
    DNA 染色后可持续几天或更长时间。Hoechst 33342 与
    Hoechst 33258 相比在水中的溶解度要低,但两种染料均具
    有高细胞膜渗透性,被广泛用于细胞凋亡检测,染色后可用
    荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。 
    实验步骤 
    1. 工作液配置 
    (1)向 EP 管中加入 1 mL ddH2O 配置 10 mg/ml 储液。 
    (2)用PBS 按照 1:2000 稀释Hoechst 33342 储液至终浓度
    为 5 μg/mL的工作液。 
    2. 染色 
    (1)对于固定的细胞或组织 
    a.  对于细胞或组织样品,固定后适当洗涤去除固定剂。如需
    免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后
    续步骤进行 Hoechst 33342 染色。 
    b.  对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33342 工作
    液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待测染色样
    品体积 3 倍的染色液,混匀。室温放置 3-5 min。 
    c.  吸除 Hoechst 33342 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水
    洗涤 2-3 次,每次 3-5 min。 
    注:清洗步骤可选但不是必须的,清洗后不影响染色。 
    d.  直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
    细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或
    呈碎块状致密浓染。 
    (2)对于活细胞或组织   
    a.  加入适量Hoechst 33342工作液,充分覆盖待染色的样品,
    通常对于六孔板每孔需加入 1 mL 的染色液,对于 96 孔板
    每孔需加入 100 μL的染色液。 
    b.  室温避光孵育10-20 min。 
    c.  弃染色液,用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可进行荧光检
    测。
        注:清洗步骤可选但不是必须的,清洗后不影响染色。  
    注意事项   
    1. Hoechst 染料通常用于染色哺乳动物细胞,但是也可以用
    来染色死活细菌,染色死活细菌时推荐在 PBS 或 150 mM 
    NaCl 中溶解为终浓度 12-15 μg/mL 的染色液室温染色 30 
    min。对酵母的染色较弱。通常对于死细胞的染色要比活细
    胞染色亮度高。 
    2. Hoechst 33342 溶于水时溶解度可达 10 mg/mL,用于细胞
    核染色时,推荐的Hoechst 33342工作浓度为0.5-10 μg/mL,
    客户可根据实际染色情况对染色液浓度及染色时间上下摸
    索。 
    3.  荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成
    检测。 
    4.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    本产品仅用于科研 

    Hoechst 33342活细胞 DNA染料