上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    Hoechst 33258活细胞 DNA染料
    物品单位 价格 品牌
    180 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:10 mg
    • 货号:XK4046
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK4046
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 10 mg
    是否进口

    Hoechst 33258活细胞 DNA染料 产品说明书 
    Hoechst 33258活细胞 DNA染料 
    产品货号:XK4046
    产品规格:10 mg 
    应用范围:核酸染色 
     产品参数 
    外观:可溶于水的黄色固体 
    Ex/Em(结合 DNA)= 352/461 nm 
    Ex/Em(未结合 DNA)= 346/460 nm 
    CAS 号:23491-45-4   
    分子式:C25H24N6O ? 3HCl   
    分子量:533.88 
    分子结构图: 
     储存条件 
    -20℃避光保存,有效期见外包装。 
     
    产品介绍 
    Hoechst 33258,也称 bis Benzimide H 33258 或 HOE 
    33258,是一种非嵌入性的亮蓝色荧光染料。染料在溶液中
    荧光较弱,但在 AT 序列富集区域的小沟处与 DNA 结合后
    荧光变得明亮,故此类染料也被称为 DNA探针。因背景较
    低,故染色细胞不需洗涤步骤,且染色非常稳定,对活细胞
    无毒,结合 DNA 染色后可持续几天或更长时间。Hoechst 
    33258 与 Hoechst 33342 相比在水中的溶解度要高,但两种
    染料均具有高细胞膜渗透性,被广泛用于细胞凋亡检测,染
    色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。 
     
    实验步骤 
    1. 工作液配置 
    (1)向 EP 管中加入 1 mL ddH2O 配置 10 mg/mL储液。 
    (2)用PBS 按照 1:2000 稀释Hoechst 33258 储液至终浓度
    为 5 μg/mL的工作液。 
    2. 染色 
    (1)对于固定的细胞或组织 
    a.  对于细胞或组织样品,固定后适当洗涤去除固定剂。如需
    免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后
    续步骤进行 Hoechst 33258 染色。 
    b.  对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33258 工作
    液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待测染色样
    品体积 3 倍的染色液,混匀。室温放置 3-5 min。 
    c.  吸除 Hoechst 33258 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水
    洗涤 2-3 次,每次 3-5 min。 
    注:清洗步骤可选但不是必须的,清洗后不影响染色。 
    d.  直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
    细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或
    呈碎块状致密浓染。 
    (2)对于活细胞或组织 
    a.  加入适量Hoechst 33258工作液,充分覆盖待染色的样品,
    通常对于六孔板每孔需加入 1 mL 的染色液,对于 96 孔板
    每孔需加入 100 μL的染色液。 
    b.  室温避光孵育10-20 min。 
    c.  弃染色液,用PBS 洗涤 2-3次即可进行荧光检测。 
    注:清洗步骤可选但不是必须的,清洗后不影响染色。 
     注意事项   
    1. Hoechst 染料通常用于染色哺乳动物细胞,但是也可以用
    来染色死活细菌,染色死活细菌时推荐在PBS或150 mM的
    NaCl 中溶解为终浓度 12-15 μg/mL 的染色液室温染色 30 
    min。对酵母的染色较弱。通常对于死细胞的染色要比活细
    胞染色亮度高。                                                                                                               
    2. Hoechst 33258 染料溶于水时溶解度可达 10 mg/mL,用于   
                                           
    细胞核染色时,推荐的 Hoechst 33258 工作浓度为 0.5-10 
    μg/mL,客户可根据实际染色情况对染色液浓度及染色时间
    上下摸索。 
    3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。  
    4. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检
    测。
    本产品仅用于科研

    Hoechst 33258活细胞 DNA染料