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      产品分类
    DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)
    物品单位 价格 品牌
    360 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:5 mg
    • 货号:XK4021
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK4021
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 5 mg
    是否进口

    DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)产品说明书
    DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)
    产品货号:XK4021
    产品规格:5 mg
    应用范围:细胞膜荧光染料、神经元顺行和逆行示踪、细胞长期示踪
    产品参数
    外观:可溶于乙醇、己烷、DMSO 或植物油的橙黄色固体
    Ex/Em(MeOH):484/501 nm
    分子式:C16H17Cl2N5
    分子量:1086
    分子结构图:
    储存条件
    4℃避光保存,有效期见外包装。
    产品介绍
    DiO Plus效能等同于 Neuro-DiO。
    DiO Plus是一种代替膜绿色荧光染料DiO的新型染料,
    DiO 由于其溶解度低、 易形成聚合物和横向扩散速度缓慢等
    缺点,很难用于神经元和细胞悬液的研究。DiO Plus和 DiO
    具有几乎相同的吸收光谱和发射光谱, 但前者具有更好的膜
    溶解性,并且不形成非荧光性的聚集体,通常这也会减慢染
    料在膜上的扩散速率。
    DiO Plus染色后可进行多聚甲醛 (不可使用甲醇等其他
    试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,
    在固定透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以
    很好地进行质膜染色。


    使用方法
    1. 染色液制备
    (1) 配置DMSO或EtOH储存液: 储存液用DMSO或EtOH
    配置浓度 1~5 mM。
    注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。
    (2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,
    HBSS或 PBS)稀释储存液,配制浓度为 1~5 μM 的工作液。
    注: 工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化
    建议从推荐浓度的 10倍范围内开始 浓度的摸索。
    2. 悬浮细胞染色
    (1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为
    1×106
    /mL。
    (2) 37℃孵育细胞 20 min, 不同的细胞 培养时间不同。
    可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一
    的标记结果。
    (3)孵育结束,1000~1500 rpm离心 5 min。倾倒上清液,
    再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。
    (4)重复步骤(3)两次以上。
    3. 贴壁细胞的染色
    (1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
    (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但表面要
    保持湿润。
    (3)在盖玻片的一角加入 100 μL的染料工作液,轻轻晃动
    使染料均匀覆盖所有细胞。
    (4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞 培养时间不
    同。 可以 20 min作为 起始孵育时间,之后
    优化体系以得到均一的标记结果。
    (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3次,每次用
    预温的培养基覆盖所有细胞, 孵育 5~10 min, 然后吸干培养
    基。但要使表面保持湿润。
    4. 结果检测
    样品可在培养基中进行检测, 可以通过荧光显微镜成像
    或流式细胞仪分析。
    注意事项
    1. DiO Plus染色固定的细胞或组织样品时, 样品宜使用配制
    在 PBS中的 4%多聚甲醛进行固定, 使用其它不适当的固定
    液会导致荧光背景较高。
    2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧
    光淬灭。
    3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    本产品仅用于科研

    DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)