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DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)
  • 品牌:XKBio
  • 产地:上海
  • 型号:5 mg
  • 货号:XK4021
  • 价格: ¥360/支
  • 发布日期: 2022-03-25
  • 更新日期: 2024-11-08
产品详请
产地 上海
品牌 XKBio
货号 XK4021
用途 科研
包装规格 5 mg
纯度 100%
CAS编号
是否进口

DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)产品说明书
DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)
产品货号:XK4021
产品规格:5 mg
应用范围:细胞膜荧光染料、神经元顺行和逆行示踪、细胞长期示踪
产品参数
外观:可溶于乙醇、己烷、DMSO 或植物油的橙黄色固体
Ex/Em(MeOH):484/501 nm
分子式:C16H17Cl2N5
分子量:1086
分子结构图:
储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
DiO Plus效能等同于 Neuro-DiO。
DiO Plus是一种代替膜绿色荧光染料DiO的新型染料,
DiO 由于其溶解度低、 易形成聚合物和横向扩散速度缓慢等
缺点,很难用于神经元和细胞悬液的研究。DiO Plus和 DiO
具有几乎相同的吸收光谱和发射光谱, 但前者具有更好的膜
溶解性,并且不形成非荧光性的聚集体,通常这也会减慢染
料在膜上的扩散速率。
DiO Plus染色后可进行多聚甲醛 (不可使用甲醇等其他
试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,
在固定透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以
很好地进行质膜染色。


使用方法
1. 染色液制备
(1) 配置DMSO或EtOH储存液: 储存液用DMSO或EtOH
配置浓度 1~5 mM。
注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,
HBSS或 PBS)稀释储存液,配制浓度为 1~5 μM 的工作液。
注: 工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化
建议从推荐浓度的 10倍范围内开始 浓度的摸索。
2. 悬浮细胞染色
(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为
1×106
/mL。
(2) 37℃孵育细胞 20 min, 不同的细胞 培养时间不同。
可以 20 min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一
的标记结果。
(3)孵育结束,1000~1500 rpm离心 5 min。倾倒上清液,
再次缓慢加入 37℃预热的生长培养液重悬细胞。
(4)重复步骤(3)两次以上。
3. 贴壁细胞的染色
(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但表面要
保持湿润。
(3)在盖玻片的一角加入 100 μL的染料工作液,轻轻晃动
使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)37℃孵育细胞 2~20 min,不同的细胞 培养时间不
同。 可以 20 min作为 起始孵育时间,之后
优化体系以得到均一的标记结果。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片 2~3次,每次用
预温的培养基覆盖所有细胞, 孵育 5~10 min, 然后吸干培养
基。但要使表面保持湿润。
4. 结果检测
样品可在培养基中进行检测, 可以通过荧光显微镜成像
或流式细胞仪分析。
注意事项
1. DiO Plus染色固定的细胞或组织样品时, 样品宜使用配制
在 PBS中的 4%多聚甲醛进行固定, 使用其它不适当的固定
液会导致荧光背景较高。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧
光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于科研

DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)

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