上海晅科生物科技有限公司
    咨询热线
    021-62457717
      产品分类
    CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒
    物品单位 价格 品牌
    221 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:100T
    • 货号:XK6034S
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK6034S
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 100T
    是否进口

    CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒 产品说明书
    CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒
    产品货号:XK6034S
    产品规格:100T, 500T
    产品内容:
    组分 C6034S(100T) C6034L(500T)
    A. CFDA SE 1管 1管×5
    B. CFDA SE溶剂 100 μL 500 μL
    C. 10× CFDA SE Buffer 10 mL 50 mL
    储存条件
    -20℃避光保存,有效期见外包装。
    产品介绍
    CFDA, SE是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪
    染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞
    在体内的分裂增殖过程。
    CFDA, SE 是二乙酸荧光素 (Fluorescein diacetate, FDA)
    的衍生物,具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当
    CFDA, SE穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催
    化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein
    succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿
    透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE还可自发并不可逆
    地与细胞内的氨基共价结合从而偶联到细胞蛋白质上。经
    CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的
    时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。
    CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的
    其他细胞示踪荧光探针如 PKH26,并且分裂后的子代细胞
    的荧光分配也很均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE标记
    荧光可平均分配至两个子代细胞中, 荧光强度变为亲代细胞
    的一半, 通过流式细胞仪 (FL1通道) 根据荧光强度的不同,
    可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次
    (1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分
    裂次数的细胞。CFDA, SE 可检测分裂次数多达八次甚至更
    多。经 CFDA, SE 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,
    且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE 最常用于淋
    巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,NK 细胞等其他
    细胞的增殖检测。
    CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光,除了流式细胞仪检测
    细胞增殖外, 还可用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观
    察。


    使用方法
    1. 试剂准备
    (1)CFDA SE储液的配制:取 1管试剂盒中提供的 CFDA
    SE,向其中加入100 μLCFDA SE 溶剂,充分溶解,即可配
    制成 CFDA SE储液(1000×)。配制好的 CFDA SE储液,
    -20℃避光保存,有效期两个月。-70℃避光保存可适当延长
    使用时间。
    (2)CFDA SE Buffer 的配制:用细胞培养级无菌水按需稀
    释10× CFDA SE Buffer至1×。 配制好的1× CFDA SE Buffer,
    可以 4℃保存,长期不用可以-20℃储存。
    2. 标记和检测
    (1)离心收集细胞,用1 mL 1×CFDA SE Buffer 重悬细胞
    于 15 mL离心管中,调整细胞浓度为 1-5×106
    cells/mL。
    (2)CFDA SE工作液的配制:将 CFDA SE储液(1000×)
    用 1×CFDA SE Buffer 稀释至 2×。
    (3)染色:将 1 mL CFDA SE工作液(2×)加入1 mL 待标
    记的细胞悬液中,上下颠倒混匀,37℃孵育 10 min。
    (4)立即向离心管中加入 5倍体积预热的完全培养基(含
    血清),上下颠倒混匀以终止标记反应。
    (5)1000rpm, 5 min 室温离心去上清,再用 5-10 mL 完全
    培养基洗涤一次。
    (6)再加入5-10 mL 完全培养基,37℃孵育 5 min,以促进
    CFDA SE在细胞内的驻留及未反应的CFDA SE进入完全细
    胞培养液。 1000rpm, 5 min离心去上清, 完成 一次洗涤。
    (7)随后即可按照细胞的正常培养方法进行培养。可以在
    荧光显微镜下直接观察标记效果, 也可以在培养适当时间后
    用流式细胞仪检测细胞增殖。
    注意事项
    1. CFDA, SE 易被水解,在水溶液中会很快变质,请在使用
    过程中避免接触水。 在标记细胞的过程中和水接触是在许可
    的范围内的。
    2. CFDA SE溶剂在 4oC、 冰浴等较低温度情况下会凝固而粘
    在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25oC 水浴温育片刻
    至全部融解后方可使用。
    3. 本试剂盒对 CFDA SE染色体系做了优化处理,但建议使
    用者根据自身的细胞类型, 培养条件以及应用方向来梯度摸
    索 的工作浓度及染色时间。
    4. 荧光染料均存在淬灭问题,操作过程中请注意避光,以
    减缓荧光淬灭。
    5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    本产品仅用于科研

    CFDA SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒