上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒)
    物品单位 价格 品牌
    264 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:20T
    • 货号:XK6024S
    • 发布日期: 2022-03-24
    • 更新日期: 2022-03-24
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK6024S
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 20T
    是否进口
    Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒)产品说明书
    Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒)
    产品货号:XK6024S
    产品规格:20T, 50T, 200T, 1000T
    组分
    规格
    F6024S(20T) F6024M(50T) F6024L(200T) F6024XL(1000T)
    A. 5×Firefly Luciferase Lysis Buffer 2 × 1 mL 5 mL 20 mL 100 mL
    B. Firefly Luciferase Assay Buffer 2 × 1 mL 5 mL 20 mL 100 mL
    C. D-Luciferin 0.4 mg 1 mg 4 mg 20 mg
    储存条件
    -80℃保存。萤火虫萤光素酶检测液(B+C)混合液不可反
    复冻融,建议进行小批量分装,并于-20℃(最长可储存 1
    个月)或-80℃(最长可储存 1 年)条件下储存。有效期见
    外包装。
    产品介绍
    真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的
    检测,生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤
    光素酶能催化底物萤光素的转化,并发射出光子。该产品为
    萤火虫萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快
    速、灵敏、稳定的检测方法。能够检测 10-20
    mol的萤光
    素酶,在 10-14
    至 10-20
    mol 的酶浓度范围内呈很好的线性关
    系。
    产品特点
    1. 快速:细胞裂解在 10-15 min 内完成。
    2. 方便:试剂易于配制,样品检测步骤简单。
    3. 灵敏:能够检测 10-20
    mol的萤光素酶。
    4. 酶的浓度线性范围可达 8个数量级。

    使用方法

    1. 细胞裂解
    (1)将转入报告基因的细胞中的培养基移除,加 PBS轻轻
    洗涤(贴壁细胞可直接进行此操作,悬浮细胞要离心收集细
    胞)。按如下方案加入 1×Lysis Buffer(用无菌水按 4:1稀释
    A 组分), 然后将培养板放在微型震荡器上室温震荡15 min,
    充分裂解细胞。
    细胞培养板
    96
    孔板
    48
    孔板
    24
    孔板
    12
    孔板
    6
    孔板
    裂解液体积 30μL 60μL 120μL 240μL 480μL
    注:裂解产物可室温保存 6 h,-70℃可长期存放(裂解产物
    不能多次反复冻融)。
    (2)将充分裂解后的裂解产物,10000-15000 rpm离心 3-5
    min。离心后将上清液移入新的 EP管中进行后续检测。
    2. 萤光素酶检测
    (1)按照仪器说明书将荧光测定仪打开,设定参数,测定
    时间为 10 s,测定间隔为 2 s。
    (2)将细胞裂解产物按照 20~100 μL 的体积加入测量管中
    (保持每次样品量一致),另外加入 100 μL 萤火虫萤光素
    酶检测液,充分混匀后测定 RLU(Relative light unit)。
    注:萤火虫萤光素酶检测液不能反复冻融,若单次实验用量
    较少,建议按照单次使用量分装成小规格。
    Firefly Luciferase Assay Kit(萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒)