PMA（叠氮溴化丙锭） 产品说明书
PMA（叠氮溴化丙锭）
产品货号：P4036
产品规格：1 mg
应用范围：核酸染色

产品参数
外观：可溶于 DMSO 或 DMF的深红色固体
Abs (pH 3) = 464 nm (before photolysis)
Abs/Em (after photocrosslinking to nucleic acid)= 510/610 nm
分子量：511.5

储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
PMA 是一种高亲和性的 DNA 结合染料，该染料本身
具有微弱的荧光，但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光。
它尤其与双链 DNA具有高亲和性。   PMA不能透过细胞膜，
因此只能选择性标记死细胞上暴露在外的 DNA。这个特性
使得PMA可以通过实时定量 PCR（qPCR）的手段，广泛用
于可被培养的病原细胞的筛选，因为PMA可与死细胞上的
DNA牢固结合，而不能用于 PCR 反应的扩增。


使用方法
1.  用合适的培养基接种、扩增细菌（扩增体积按具体实验要
求而定）；
2. 37℃，200 rpm，过夜震荡培养；
3.  继续培养细菌，直至其培养悬液 OD600值接近 1；
4. 58℃ 3 h 或者90℃ 5 min，灭活细菌，制备死菌对照样品；
5.  吸取500 μL等分细菌培养液置于干净微量离心管中；
6.  向装有细菌悬液的微量离心管中加入适量 PMA，使其终
浓度为 50 μM；
7.  室温避光孵育5 min，孵育期间可以适当指拨混匀，也可
以盖上铝箔纸置于摇床孵育；
8.  将样品曝光，可以使用蓝色或白色光源，不同的光源照射
时间需自行摸索，使 PMA 与 DNA 充分交联。例如，可用
60W的蓝光灯，照射 15 min。通常，光线越亮，效率越高。
非 LED 灯（如卤素灯）可能会加热样品对测定产生负面影
响，照射时需要对样品降温处理；
9. 5,000 g，10 min 离心样品；
10.  使用标准方法或试剂盒抽提基因组 DNA，用于后续的
qPCR 实验；
11.  进行 qPCR 实验，样品中被 PMA 修饰的 DNA 将会在
qPCR 反应中表现出扩增延迟效应；
注：标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定
条件。以上方法仅供参考。

注意事项
1.  荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光
淬灭。
PMA（叠氮溴化丙锭）