上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    PMA(叠氮溴化丙锭)
    物品单位 价格 品牌
    885 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:1 mg
    • 货号:P4036
    • 发布日期: 2022-03-24
    • 更新日期: 2022-06-22
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 P4036
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 1 mg
    是否进口
    PMA(叠氮溴化丙锭) 产品说明书
    PMA(叠氮溴化丙锭)
    产品货号:P4036
    产品规格:1 mg
    应用范围:核酸染色

    产品参数
    外观:可溶于 DMSO 或 DMF的深红色固体
    Abs (pH 3) = 464 nm (before photolysis)
    Abs/Em (after photocrosslinking to nucleic acid)= 510/610 nm
    分子量:511.5

    储存条件
    4℃避光保存,有效期见外包装。

    产品介绍
    PMA 是一种高亲和性的 DNA 结合染料,该染料本身
    具有微弱的荧光,但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光。
    它尤其与双链 DNA具有高亲和性。   PMA不能透过细胞膜,
    因此只能选择性标记死细胞上暴露在外的 DNA。这个特性
    使得PMA可以通过实时定量 PCR(qPCR)的手段,广泛用
    于可被培养的病原细胞的筛选,因为PMA可与死细胞上的
    DNA牢固结合,而不能用于 PCR 反应的扩增。


    使用方法
    1.  用合适的培养基接种、扩增细菌(扩增体积按具体实验要
    求而定);
    2. 37℃,200 rpm,过夜震荡培养;
    3.  继续培养细菌,直至其培养悬液 OD600值接近 1;
    4. 58℃ 3 h 或者90℃ 5 min,灭活细菌,制备死菌对照样品;
    5.  吸取500 μL等分细菌培养液置于干净微量离心管中;
    6.  向装有细菌悬液的微量离心管中加入适量 PMA,使其终
    浓度为 50 μM;
    7.  室温避光孵育5 min,孵育期间可以适当指拨混匀,也可
    以盖上铝箔纸置于摇床孵育;
    8.  将样品曝光,可以使用蓝色或白色光源,不同的光源照射
    时间需自行摸索,使 PMA 与 DNA 充分交联。例如,可用
    60W的蓝光灯,照射 15 min。通常,光线越亮,效率越高。
    非 LED 灯(如卤素灯)可能会加热样品对测定产生负面影
    响,照射时需要对样品降温处理;
    9. 5,000 g,10 min 离心样品;
    10.  使用标准方法或试剂盒抽提基因组 DNA,用于后续的
    qPCR 实验;
    11.  进行 qPCR 实验,样品中被 PMA 修饰的 DNA 将会在
    qPCR 反应中表现出扩增延迟效应;
    注:标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定
    条件。以上方法仅供参考。


    注意事项
    1.  荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光
    淬灭。
    PMA(叠氮溴化丙锭)