上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    PicoGreenTM 核酸荧光染料
    物品单位 价格 品牌
    2800 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:1mL
    • 货号:XK2023
    • 发布日期: 2022-03-24
    • 更新日期: 2022-03-24
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK2023
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 1mL
    是否进口
    PicoGreenTM 核酸荧光染料产 品 说 明 书
    PicoGreenTM 核酸荧光染料
    产品货号:XK2023
    产品规格:1 mL
    储存条件
    4℃避光保存,有效期见外包装。
    产品参数
    Ex/Em:480/520 nm(结合 dsDNA)
    产品介绍
    PicoGreen是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品,
    这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术:cDNA文库的
    构建、亚克隆的DNA-片段纯化及应用,比如进行DNA定量、
    产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量的检测方
    法是在260 nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷
    酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到核
    酸制备过程中污染物的干扰,无法区分DNA和RNA,而且
    这种方法不灵敏 (5 μg/mL dsDNA溶液A260=0.1) 。 PicoGreen
    定量检测方法简单、方便,成为生物制品残留DNA检测的
    标准。
    PicoGreen 只有与 dsDNA 结合后才发出荧光, 并且所发
    荧光强度与 DNA 浓度成正比。PicoGreen 可以检测出 25
    pg/mL-1000 ng/mL 范围内的 dsDNA,且线性关系较好
    (R2

    >0.99)。

    使用方法
    试剂制备
    PicoGreen dsDNA定量试剂是以1 mL的浓缩液形式保
    存在无水的DMSO(二甲基亚砜)中。实验时,配制
    2×PicoGreen工作液:将浓缩液用1×TE(10 mM Tris-HCl,
    1 mM EDTA,pH 7.5)按1:200的比例稀释。对于终体积为
    200 μL的检测体系, 如需准备足够20个样品测定的工作液,
    可在2 mL 1×TE中加入10 μL PicoGreen;对于终体积为2
    mL的检测体系,如需准备足够20个样品测定的工作液,则
    需要在20 mL 1×TE中加入100 μL PicoGreen浓缩液。 由于试
    剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。PicoGreen
    见光易降解,因此要注意避光保存。
    溶液 在配制好数小时内使用,以保证 结果。
    实验方法
    1. 标准品工作液的配制:
    Sigma小牛胸腺嘧啶DNA干粉1 mg(Tris,NaCl等浓度
    已成标准体系),加入1 mL双蒸水,配制成1 mg/mL的标准
    液。
    2. 染料工作液的配置:
    5 μL PicoGreen加入1 mL TE (注意: 用1×TE将PicoGreen
    稀释200倍,现用现配,注意避光)。
    3. 标准液稀释:
    (1) 母液稀释: 取10 μL (1 mg/mL) 标准液加入到990 μL TE
    溶液中,稀释成10 μg/mL,取10 μL(10 μg/mL)标准液加
    入到990 μL TE 溶液中,稀释成100 ng/mL。
    (2)倍比稀释:取800 μL(100 ng/mL)的标准液加入到200
    μL TE溶液中,浓度为80 ng/mL,取500 μL(80 ng/mL)的
    标准液加入到500 μL TE溶液中,稀释到40 ng/mL;依次倍
    比稀释,配成20 ng/mL、10 ng/mL、5.0 ng/mL、2.5 ng/mL。
    4. 标准曲线的制备:倍比稀释后的各梯度标准品溶液和染
    料工作液各取100 μL混匀,避光室温放置5 min。使用FB-15
    型便携式荧光仪检测样品的荧光值: 将混合后的溶液加入微
    量比色皿,注意不要在样品中引入气泡,轻弹微量检测皿的
    PicoGreenTM 核酸荧光染料