WonderOrangeTM蛋白定量试剂盒 产品说明书
WonderOrangeTM蛋白定量试剂盒
产品货号：XK6006S
产品规格：100T, 1000T
产品内容：
组分 100T 1000T
A.WonderOrange buffer, 10× (contains 2 mM sodium azide) 2 × 1.25 mL 25 mL
B.WonderOrange dye, 200×in DMSO 125 μL 1.25 mL
C. Bovine serum albumin (BSA) standard, 2 mg/mL (contains 2 mM sodium azide) 40 μL 0.4 mL
次数是基于 96孔板计算
储存条件
常温保存，有效期见外包装。
产品参数
Ex/Em 480/598 nm（结合 BSA），图 1是 WonderOrange 的
光谱图。
图 1. WonderOrange 与 BSA 在 1×WonderOrange assay buffer
条件下的光谱图。

产品介绍
WonderOrange™ Protein Quantitation Kit 是一个高度敏
感的基于荧光技术定量纯化蛋白质的试剂盒， 其检测蛋白浓
度范围为0.1-10 μg/mL。 比起传统定量方法如BCA、 Bradford
或 Lowry 蛋白定量分析，WonderOrange 蛋白定量试剂盒敏
感性更佳，此外，与 NanoOrange 蛋白质定量测定技术相比
具有更加优秀的线性和重现性（图 2）。WonderOrange 蛋白
定量试剂盒可显示不同蛋白质之间的最小变异性， 且荧光信
号稳定长达 16 h；其受测样本不论为纯化蛋白或抗体皆适
用。
需特别注意的是，WonderOrange 对盐类、缓冲液、去
垢剂或是其他化学物质都有不同程度的耐受性（表 2）。

图2.WonderOrange比NanoOrange有更佳的线性与重现性。
使用方法
1. 准备 1×WonderOrange 缓冲液：1:10 稀释 10×缓冲液在
dH2O中。例如，添加 1 mL 10×缓冲液至 9 mL dH2O。
注：A 组分 WonderOrange buffer, 10×容易产生沉淀，使用时
可 50℃加热，沉淀解后使用。
2. 使用前准备WonderOrange工作液： 将200×WonderOrange
染料按 1:200用 1×WonderOrange 缓冲液稀释。例如，添加
25 μL 200×WonderOrange 染料至 5 mL 1×WonderOrange 缓
冲液。
注意：您将需要大约 3 mL 工作液制作标准曲线（见表 1）
以及每孔检测样品 250 μL 工作液。
3. 准备未知样本：10 μL 样本添加250 μLWonderOrange 工
作液。
注意：您可能需要稀释未知样本以得到不同浓度的样本。样
品稀释可能会减少干扰物质的影响。
4. 准备测蛋白标准曲线所需的 BSA浓度，如表 1所示。
5. 样本和标准蛋白加热至 90℃- 95℃10 min，此过程需避
光操作。
6. 取出样本室温避光放置冷却。短时离心收集全部样本。
7. 每个标准样品或未知样品取200 μL转移到96孔酶标板，
荧光酶标仪读数。激发/发射波长为 480/598 nm。
注意：另外，样品可以被转移到荧光试管使用荧光仪测量。
如果需要超过 200 μL 体积测量，等比例放大配制方案。
表 1 准备标准曲线 BSA 样品
BSA 体积
工作液
体积
BSA
终浓度
（ug/mL） A 5 μL BSA std (2 mg/mL) 995 μL 10 μg/mL
B 250 μL solutionA 250 μL 5 μg/mL
C 250 μL solution B 250 μL 2.5 μg/mL
D 200 μL solution C 300 μL 1 μg/mL
E 250 μL solution D 250 μL 0.5 μg/mL
F 250 μL solution E 250 μL 0.25 μg/mL
G 100 μL solution F 150 μL 0.1 μg/mL
H 0 mL 250 μL 0 μg/mL
表 2WonderOrange 对不同化学物质的耐受性
化合物 承受浓度
SDS 0.01%
Triton X-100 Below 0.001%
Tween 20 Below 0.001%
CHAPS Below 0.001%
Sodium deoxycholate (DOC) Below 0.001%
Urea 10 mM
DTT 100 mM
beta-ME 0.1%
Ammonium sulfate 1 mM
Sodium azide 2 mM
Imidazole 50 mM
DNA 10 ug/mL
EDTA 1 mM
Sucrose 10 mM (0.34%)
Glycerol 1%
PBS 0.02X
NaCl 1 mM
CaCl2 0.01 mM
MgCl2 0.2 mM
本产品仅用于科研

WonderOrangeTM蛋白定量试剂盒