上海晅科生物科技有限公司
服务热线:13671826025
Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)
  • 品牌:XKBio
  • 产地:上海
  • 型号:50 μL
  • 货号:XK3015
  • 价格: ¥650/支
  • 发布日期: 2022-03-25
  • 更新日期: 2024-12-04
产品详请
产地 上海
品牌 XKBio
货号 XK3015
用途 科研
包装规格 50 μL
纯度 100%
CAS编号
是否进口

Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)产品说明书
Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)
产品货号:XK3015
产品规格:50 μL
产品参数
Ex/Em:506/526 nm(结合Ca2+
后)
CAS号:121714-22-5
分子式:C51H50Cl2N2O23
分子量:1129.9
分子结构图:


储存条件
-20℃干燥避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
Fluo-3, AM ester是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。
Fluo-3, AM ester进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形
成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合,
结合钙离子后可以产生较强的荧光。
使用方法
1. 将溶液形式的Fluo-3, AM ester储液取出于室温回温。
2. 用PBS或HBSS等缓冲液稀释Fluo-3, AM ester储液, 制备4
μM的Fluo-3, AM ester工作液。
注:为了避免过度加载造成细胞毒性,建议在取得有效结果
的基础上使用 探针浓度。
3.(可选)如果Fluo-3, AM ester进入细胞的效果不好,可向
Fluo-3, AM ester溶液中加入适量20 % Pluronic F-127溶液,
防止Fluo-3, AM ester在缓冲液中聚集并促进Fluo-3, AM
ester进入细胞,Pluronic F-127终浓度控制在0.04-0.05 %。
注: (1)20 % (w/v) 的Pluronic F-127 DMSO母液配制:100
mg Pluronic F-127中加入0.5 mL DMSO,配制成20 % (w/v)
的DMSO母液。溶解需要在40-50℃加热20-30 min。溶解后
室温保存, 勿冷藏。 如果有结晶析出, 可以重新加热后溶解,
不影响使用。
(2)Pluronic F-127可降低Fluo-3, AM ester的稳定性,
因此只建议在配制工作液时加入,不建议将其加入储液中。
4. 取出预培养的细胞,除去培养基,使用PBS或HBSS溶液
洗涤细胞3次。
5. 去除缓冲液, 将Fluo-3, AM ester工作液加入细胞中, 37℃
培养10-60 min。
注:如果 实验不能确定孵育温度和时间,建议尝试37℃
孵育20 min,观察荧光效果。若细胞死亡较多,则适当缩短
时间或降低温度;如果荧光强度太弱,则适当延长时间。
6. 去除Fluo-3, AM ester工作液,用PBS或HBSS等缓冲液洗
涤细胞3次,然后用PBS或HBSS等缓冲液重悬细胞,制成
1×105
cells/mL的细胞悬液。
7. 37℃培养10 min,确保AM ester体在细胞内的完全去酯化
作用。
8. 进行荧光钙离子检测。
注意事项
1. 如果使用含有血清的培养基,血清中的酯酶会分解AM
ester体,从而降低Fluo-3, AM ester进入细胞的效果。另外,
含有酚红的培养基会使本底值略微偏高, 加工作液前应尽量
去除残留培养基。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧
光淬灭。
3. Fluo-3, AM ester容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥
的环境放至室温后开封。由于试剂极微量,开封前请将其短
暂离心,以保证粉末落入管底。
4. Fluo-3, AM ester 遇水极易分解,如果不能一次用完,建
议将储液小量分装保存。
本产品仅用于科研

Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)

联系方式
手机:13671826025
Q Q:
手机访问官网