上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)
    物品单位 价格 品牌
    650 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:50 μL
    • 货号:XK3015
    • 发布日期: 2022-03-25
    • 更新日期: 2022-03-25
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK3015
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 50 μL
    是否进口

    Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)产品说明书
    Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)
    产品货号:XK3015
    产品规格:50 μL
    产品参数
    Ex/Em:506/526 nm(结合Ca2+
    后)
    CAS号:121714-22-5
    分子式:C51H50Cl2N2O23
    分子量:1129.9
    分子结构图:


    储存条件
    -20℃干燥避光保存,有效期见外包装。
    产品介绍
    Fluo-3, AM ester是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。
    Fluo-3, AM ester进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形
    成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合,
    结合钙离子后可以产生较强的荧光。
    使用方法
    1. 将溶液形式的Fluo-3, AM ester储液取出于室温回温。
    2. 用PBS或HBSS等缓冲液稀释Fluo-3, AM ester储液, 制备4
    μM的Fluo-3, AM ester工作液。
    注:为了避免过度加载造成细胞毒性,建议在取得有效结果
    的基础上使用 探针浓度。
    3.(可选)如果Fluo-3, AM ester进入细胞的效果不好,可向
    Fluo-3, AM ester溶液中加入适量20 % Pluronic F-127溶液,
    防止Fluo-3, AM ester在缓冲液中聚集并促进Fluo-3, AM
    ester进入细胞,Pluronic F-127终浓度控制在0.04-0.05 %。
    注: (1)20 % (w/v) 的Pluronic F-127 DMSO母液配制:100
    mg Pluronic F-127中加入0.5 mL DMSO,配制成20 % (w/v)
    的DMSO母液。溶解需要在40-50℃加热20-30 min。溶解后
    室温保存, 勿冷藏。 如果有结晶析出, 可以重新加热后溶解,
    不影响使用。
    (2)Pluronic F-127可降低Fluo-3, AM ester的稳定性,
    因此只建议在配制工作液时加入,不建议将其加入储液中。
    4. 取出预培养的细胞,除去培养基,使用PBS或HBSS溶液
    洗涤细胞3次。
    5. 去除缓冲液, 将Fluo-3, AM ester工作液加入细胞中, 37℃
    培养10-60 min。
    注:如果 实验不能确定孵育温度和时间,建议尝试37℃
    孵育20 min,观察荧光效果。若细胞死亡较多,则适当缩短
    时间或降低温度;如果荧光强度太弱,则适当延长时间。
    6. 去除Fluo-3, AM ester工作液,用PBS或HBSS等缓冲液洗
    涤细胞3次,然后用PBS或HBSS等缓冲液重悬细胞,制成
    1×105
    cells/mL的细胞悬液。
    7. 37℃培养10 min,确保AM ester体在细胞内的完全去酯化
    作用。
    8. 进行荧光钙离子检测。
    注意事项
    1. 如果使用含有血清的培养基,血清中的酯酶会分解AM
    ester体,从而降低Fluo-3, AM ester进入细胞的效果。另外,
    含有酚红的培养基会使本底值略微偏高, 加工作液前应尽量
    去除残留培养基。
    2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧
    光淬灭。
    3. Fluo-3, AM ester容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥
    的环境放至室温后开封。由于试剂极微量,开封前请将其短
    暂离心,以保证粉末落入管底。
    4. Fluo-3, AM ester 遇水极易分解,如果不能一次用完,建
    议将储液小量分装保存。
    本产品仅用于科研

    Fluo-3, AM ester(钙离子荧光探针, 2mM)