APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒产品说明书
APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
产品货号：XK6030S
产品规格：10T, 50T, 100T
产品内容：
组分
规格 A6030S（10T） A6030M（50T） A6030L（100T）
A. 1×Annexin V 结合缓冲液 10 mL 50 mL 50 mL×2
B. Annexin V-APC 50 μL 250 μL 500 μL
C. PI 100 μL 500 μL 1 mL
储存条件
4℃避光冷藏，请勿冻存。有效期见外包装。
光谱特性
Annexin V-APC: Ex/Em = 650/660 nm

PI: Ex/Em=535 nm/617 nm (with DNA)

产品介绍
Annexin V-APC/PI 细胞凋亡检测试剂盒是用远红外荧
光蛋白 APC （Allophycocyanin） 标记的 Annexin V 作为探针，
来检测细胞早期凋亡的发生；PI 用来检测晚期凋亡细胞或
者坏死细胞。因此将 Annexin V-APC与 PI 联合使用，可以
区分早凋与晚凋细胞。 可用流式细胞仪或其他荧光检测设备
进行检测。
使用方法
1. 根据实验要求诱导细胞凋亡。检测样品中应包含未经处
理的细胞样品， 作为阴性对照； 一组凋亡处理的样品做单染，
用于调节补偿。
2. 收集细胞
悬浮细胞：1000 rpm，离心5 min收集细胞；
贴壁细胞：用不含 EDTA的胰酶消化，胰酶消化时间不宜过
长，以防引起假阳性。1000 rpm，离心 5 min收集细胞。对
于特定的细胞，如果细胞无法完全离心至管底，可以适当延
长离心时间或略微增大离心力。此外，需小心吸除上清，可
以残留约 50 μL的培养液，以避免吸走细胞。
注： 用胰蛋白酶消化然后使细胞在 细胞培养条件和培养
基中恢复约 30 min，然后再染色，从而避免假阳性。
3. 加入 1 mL 4℃预冷的 1× PBS，重悬细胞，再次离心沉淀
细胞，小心吸除上清。
4. 用 1×结合缓冲液重悬细胞，调节细胞浓度为 1~5×10^6
个/mL。
5. 取 100 μL的细胞悬液 1.5 mL Ep管中， 加入 5 μLAnnexin
V-APC和 5 μL PI，混匀后室温避光孵育 10-15 min（推荐额
外准备两管凋亡细胞， 每管只加入一种染料： Annexin V-APC
或 PI，用于流式单染的补偿调节） 。
6. 加入 400 μL 1× Annexin V 结合缓冲液，混匀，进行流式
检测。Annexin V-APC 由 633 nm 激发，选择 FL4 或 RL 通
道检测，PI 由488 nm激发，选择 FL3 或BL3 通道检测。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注
APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒