上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
    物品单位 价格 品牌
    264 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:10T
    • 货号:XK6030S
    • 发布日期: 2022-03-24
    • 更新日期: 2022-03-24
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK6030S
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 10T
    是否进口
    APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒产品说明书
    APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
    产品货号:XK6030S
    产品规格:10T, 50T, 100T
    产品内容:
    组分
    规格 A6030S(10T) A6030M(50T) A6030L(100T)
    A. 1×Annexin V 结合缓冲液 10 mL 50 mL 50 mL×2
    B. Annexin V-APC 50 μL 250 μL 500 μL
    C. PI 100 μL 500 μL 1 mL
    储存条件
    4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装。
    光谱特性
    Annexin V-APC: Ex/Em = 650/660 nm

    PI: Ex/Em=535 nm/617 nm (with DNA)

    产品介绍
    Annexin V-APC/PI 细胞凋亡检测试剂盒是用远红外荧
    光蛋白 APC (Allophycocyanin) 标记的 Annexin V 作为探针,
    来检测细胞早期凋亡的发生;PI 用来检测晚期凋亡细胞或
    者坏死细胞。因此将 Annexin V-APC与 PI 联合使用,可以
    区分早凋与晚凋细胞。 可用流式细胞仪或其他荧光检测设备
    进行检测。
    使用方法
    1. 根据实验要求诱导细胞凋亡。检测样品中应包含未经处
    理的细胞样品, 作为阴性对照; 一组凋亡处理的样品做单染,
    用于调节补偿。
    2. 收集细胞
    悬浮细胞:1000 rpm,离心5 min收集细胞;
    贴壁细胞:用不含 EDTA的胰酶消化,胰酶消化时间不宜过
    长,以防引起假阳性。1000 rpm,离心 5 min收集细胞。对
    于特定的细胞,如果细胞无法完全离心至管底,可以适当延
    长离心时间或略微增大离心力。此外,需小心吸除上清,可
    以残留约 50 μL的培养液,以避免吸走细胞。
    注: 用胰蛋白酶消化然后使细胞在 细胞培养条件和培养
    基中恢复约 30 min,然后再染色,从而避免假阳性。
    3. 加入 1 mL 4℃预冷的 1× PBS,重悬细胞,再次离心沉淀
    细胞,小心吸除上清。
    4. 用 1×结合缓冲液重悬细胞,调节细胞浓度为 1~5×10^6
    个/mL。
    5. 取 100 μL的细胞悬液 1.5 mL Ep管中, 加入 5 μLAnnexin
    V-APC和 5 μL PI,混匀后室温避光孵育 10-15 min(推荐额
    外准备两管凋亡细胞, 每管只加入一种染料: Annexin V-APC
    或 PI,用于流式单染的补偿调节) 。
    6. 加入 400 μL 1× Annexin V 结合缓冲液,混匀,进行流式
    检测。Annexin V-APC 由 633 nm 激发,选择 FL4 或 RL 通
    道检测,PI 由488 nm激发,选择 FL3 或BL3 通道检测。
    注意事项
    1. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注
    APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒