上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    Cell Cycle Assay Kit Plus(细胞周期检测试剂盒升级版)
    物品单位 价格 品牌
    600 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:50T
    • 货号:XK6078
    • 发布日期: 2022-03-24
    • 更新日期: 2022-03-24
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK6078
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 50T
    是否进口
    Cell Cycle Assay Kit Plus(细胞周期检测试剂盒升级版)产品说明书
    Cell Cycle Assay Kit Plus(细胞周期检测试剂盒升级版)
    产品货号:XK6078
    产品规格:50T
    产品内容:
    组分 50T
    A. 染色缓冲液(10×) 10 mL
    B. RedNucleus I 染色液 200 μL
    储存条件
    4℃保存,有效期见外包装。长期储存请于-20℃保存。
    RedNucleus I 染色液需避光保存。
    产品介绍
    细胞周期检测试剂盒升级版 (Cell Cycle Assay Kit Plus)
    采用 RedNucleus I 染色法检测细胞周期,RedNucleus I 是一
    种远红外核酸染料,具有细胞膜透性,可快速进入活细胞,
    特异结合 DNA,对活细胞进行周期检测,且无需 RNase 的
    消化。与传统的碘化丙啶染色(PI staining)方法相比,细
    胞无需破膜或固定,操作更加简便。
    RedNucleus I 是一种双链 DNA 的荧光染料,与双链
    DNA 结合后的荧光强度和双链 DNA 的含量成正比。 可通过
    流式细胞仪测定细胞内 DNA 含量,然后根据 DNA 含量的
    分布情况,进行细胞周期分析。RedNucleus I 染色后,假设
    G0/G1期细胞的荧光强度为 1, 那么含有双份基因组DNA 的
    G2/M 期细胞的荧光强度的理论值为 2,正在进行 DNA 复制
    的 S 期细胞的荧光强度为 1-2之间。此外,RedNucleus I 与
    Horizon BV/BUV、FITC 和 R-PE 等染料兼容,可在样品染
    色后进行周期检测。
    本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周
    期检测,如果用于组织的细胞周期检测,则必须先把组织消
    化成单细胞状态。
    使用方法
    实验材料
    ? 细胞株或其他细胞样品(自备)
    ? 本试剂盒
    ? 胰酶(自备)

    ? 含 FBS的细胞培养基(自备)

    实验步骤

    1. 细胞样品的准备:
    (1)(此步骤是针对贴壁细胞,若为悬浮细胞,可直接进
    行第(2)步)用胰酶消化细胞,加入细胞培养液,轻轻吹
    散细胞后,收集到离心管内。
    (2)1000 g 左右离心3-5 min,沉淀细胞。小心吸除上清,
    加入约 1 mL 冰浴预冷的 1×的染色缓冲液(将 10×的染色缓
    冲液用 diH2O按 1:10稀释),重悬细胞。重复一次。
    (3)1000 g左右离心 3-5 min,沉淀细胞。弃上清后,加入
    1 mL 培养基重悬细胞(对于固定细胞,也可用 1×PBS 重
    悬)。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
    2. 染色:每管细胞样品中加入 4 μL 的 RedNucleus I 染色
    液,缓慢并充分混匀,室温避光孵育 20 min(或在 37℃避
    光孵育 5-10 min)。
    3. 流式检测和分析:用流式细胞仪在 638 nm处激发,推荐
    在 RL3 或 FL4通道检测,也可使用 RL1、RL2 通道检测。
    采用适当分析软件进行细胞 DNA 含量分析和光散射分析。
    Cell Cycle Assay Kit Plus(细胞周期检测试剂盒升级版)