Cell Counting Kit-8（CCK-8）细胞增殖试剂盒产品说明书
Cell Counting Kit-8（CCK-8）细胞增殖试剂盒
产品货号 XK6005S
产品规格 100T 500T 3000T 10000T 5×10000T
组分 1 mL 5 mL 30 mL 100 mL 5×100 mL
储存条件
4℃避光保存，长期储存置于-20℃，有效期见外包装。
产品介绍
Cell Counting Kit-8 简称 CCK8（或 WST-8）试剂盒，
是一种基于 WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-
硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）显色反应的广泛
应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8 工作原理：在电子耦合试剂存在的条件下，可
以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲
臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与
细胞毒性成反比。 使用酶标仪在 450 nm波长处测定 OD 值，
间接反映活细胞数量。
WST-8 是 MTT 的一种升级替代产品，和 MTT 或其它
MTT 类似产品如 XTT、MTS 等相比有明显的优点。首先，
MTT 被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的甲臜不是水溶性
的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8、XTT 和 MTS
产生的甲臜都是水溶性的， 可以省去后续的溶解步骤。 其次，
WST-8 产生的甲臜比 XTT 和 MTS 产生的甲臜更易溶解。
再次，WST-8 比 XTT 和 MTS 更加稳定，使实验结果更加
稳定。另外，WST-8与MTT、XTT 相比线性范围更宽，灵
敏度更高。
CCK 法广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒
性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等方面。

使用方法

1. 细胞活性检测
（1）在 96 孔板中接种细胞悬液（100 μL/孔）。将培养板
放在培养箱中预培养（37℃, 5% CO2）。
（2）向每孔加入 10 μL CCK 溶液（注意不要在孔中生成气
泡，它们会影响 OD 值的读数）。
注：如产品有析出，可 37℃水浴处理，不影响使用。
（3）将培养板在培养箱内孵育1-4 h。
（4）用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
（5）若暂时不测定 OD 值，可以向每孔中加入 10 μL 0.1 M
的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS溶液，并将培养板在室温条件
下避光保存。24 h内测定，吸光度不会发生变化。
2. 细胞增殖-毒性检测
（1）在 96孔板中接种 100 μL 的细胞悬液。将培养板在培
养箱预培养 24 h（37℃，5% CO2）。
（2）向培养板加入1-10 μL不同浓度的待测物质。
（3）于培养箱中孵育一段时间（例如：6、12、24或48 h） 。
（4）向每孔加入 10 μL CCK 溶液（注意不要在孔中生成气
泡，它们会影响 OD 值的读数）。
注：如产品有析出，可37℃水浴处理，不影响使用。
（5）将培养板在培养箱内孵育1- 4 h。
（6）用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
（7）若暂时不测定 OD 值，可以向每孔中加入 10 μL 0.1 M
的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存
在室温条件下。24 h内测定，吸光度不会发生变化。

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本产品仅用于科研

Cell Counting Kit-8（CCK-8）细胞增殖试剂盒