上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    DualucifTM Firefly & Renilla Assay Kit(双荧光素酶报告基因检测试剂盒)
    物品单位 价格 品牌
    286 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:20T
    • 货号:XK6075S
    • 发布日期: 2022-03-24
    • 更新日期: 2022-03-24
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK6075S
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 20T
    是否进口
    DualucifTM Firefly & Renilla Assay Kit(双萤光素酶报告基因检测试剂盒)产品说明书
    DualucifTM Firefly & Renilla Assay Kit(双萤光素酶报告基因检测试剂盒)
    产品货号:XK6075S
    产品规格:20T, 100T, 1000T
    组分
    规格
    F6075S(20T) F6075M(100T) F6075L(1000T)
    A. 5× Passive Luciferase Lysis Buffer 2 × 1 mL 10 mL 100 mL
    B. Firefly Luciferase Assay Buffer 2 × 1 mL 10 mL 100 mL
    C. D-Luciferin 0.4 mg 2 mg 20 mg
    D. Renilla Luciferase Assay Buffer 2 × 1 mL 10 mL 100 mL
    E. 50× Coelenterazine 40 μL 200 μL 2 × 1 mL
    储存条件
    -80℃保存。将 C组分溶解到 B 组分后,该混合液不可反复
    冻融,建议进行小批量分装,并于-20℃(最长可储存 1 个
    月) 或-80℃ (最长可储存1年) 条件下储存。 Renilla Luciferase
    Assay solution(D+E)应新鲜配制,当天-使用。有效期见外

    包装。

    产品介绍
    Dualucif
    TM Firefly & Renilla Assay Kit(双萤光素酶报告
    基因检测试剂盒)为检测基因的表达量提供有效的手段,在
    DLR 检测中,萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)和海肾
    萤光素酶(Renilla luciferase)的活性可在单个样品中依次检
    测。先以萤光素(Luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶
    的活性,然后加入抑制萤火虫萤光素酶催化的物质,同时加
    入腔肠素(Coelenterazine)检测海肾萤光素酶的活性,实现
    双萤光素酶报告基因检测。 通过萤光素酶和其底物这一生物
    发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把
    感兴趣基因的转录调控元件或 5' 启动子区克隆在
    Luciferase的上游, 或把3'-UTR 区克隆在Luciferase的下游,
    构建成报告基因(Reporter gene)质粒,然后转染细胞,用
    适当药物等处理细胞后裂解细胞, 通过检测萤光素酶活性的
    高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。 海肾萤
    光素酶更多地被用作检测转染效率的内参, 以消除细胞数量
    和转染效率的差异。
    萤火虫萤光素酶是一种分子量约为 61 kD 的蛋白,在
    ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化萤光素生成氧
    化萤光素(Oxyluciferin),在萤光素被氧化的过程中,会
    产生光信号。海肾萤光素酶是一种分子量约为 36 kD 的蛋
    白,在氧气存在的条件下,可以催化腔肠素氧化成肠酰胺
    (Coelenteramide),在腔肠素氧化的过程中也会产生光信
    号。本试剂盒的光信号可以通过化学发光仪、酶标仪或液闪
    测定仪进行测定。该试剂盒具有检测迅速、灵敏度高、检测
    范围广,无细胞内源活性干扰等特点。
    使用方法
    1. 细胞裂解
    (1)将培养基移除,加 PBS 轻轻洗涤两次(贴壁细胞可直
    接进行此操作,悬浮细胞需离心收集细胞)。按如下方案加
    入 1× Lysis Buffer(用无菌水按4: 1 稀释组分 A),然后将
    培养板放在微型震荡器上室温震荡 15 min,充分裂解细胞。
    DualucifTM Firefly & Renilla Assay Kit(双萤光素酶报告基因检测试剂盒)