上海晅科生物科技有限公司
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      产品分类
    Biolife Green I, 20× in water(PCR级)
    物品单位 价格 品牌
    148 XKBio
    • 产地:上海
    • 型号:1 mL
    • 货号:XK2017
    • 发布日期: 2022-03-24
    • 更新日期: 2022-03-24
    产品详细说明
    产地 上海
    品牌 XKBio
    货号 XK2017
    用途范围 科研
    纯度 100%
    CAS编号
    规格 1 mL
    是否进口
    Biolife Green I, 20× in water(PCR级)产品说明书

    Biolife Green I, 20×  in water(荧光定量 PCR 级染料)
    产品货号:XK2017
    产品规格:1 mL

    储存条件
    本产品 4℃避光保存,有效期见外包装。使用前,将产品室
    温下解冻,并轻轻涡旋混匀,解冻后所有实验应在冰上操作。
    该产品避免反复冻融。

    产品介绍
    Biolife Green I 效能等同于 Sybr Green I。
    Biolife Green I是一种结合于dsDNA双螺旋小沟区域的
    具有绿色激发光的荧光染料。 Biolife Green I 与 dsDNA结合
    后荧光信号会增强 800-1000 倍,是一种常用的 qPCR 荧光
    染料。该染料经济实惠、使用方便,具有高灵敏度,信噪比
    高等优势,可应用于基因表达差异分析,基因芯片等。


    使用方法
    1.  建立如下实验体系:(仅供参考)
    名 称  体 积
    10×的无 Mg2+聚合酶缓冲液  5 μL
    50 mM MgCl2  2.5 μL
    2 mM dNTP  5 μL
    20×  Biolife Green  2.5 μL
    Taq DNA polymerase  1-5 units
    F, R Primers  各 0.1-0.5 μM
    模板 DNA  适量
    dH2O  补足总体积至 50 μL
    注:DNA模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同种类的
    DNA 模板中含有的靶基因的拷贝数不同,必要时可进行梯
    度稀释,确定合适的 DNA 模板添加量。cDNA 作为模板时
    的添加量不要超过 PCR 反应液总体积的 10%。
    2.  执行实时定量PCR 程序,采集荧光信号。
    程序  温度  时间  循环
    酶激活  95℃  2 min  1
    变性
    退火
    延伸
    95℃
    50-60℃
    72℃
    5 s
    45  5 s
    25 s
    3.  分析数据。

    注意事项
    1. Biolife Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功
    的关键因素。染料浓度过低会使荧光信号变化降低,导致低
    拷贝的样品可能无法检出,而在高浓度时又会抑制 PCR 反
    应。所以一般在使用 Biolife Green 染料时应根据实际情况优
    化使用浓度,反应的终浓度为 1×到 0.2×之间。
    2.  提高Mg2+浓度可以降低 Biolife Green I 对PCR 反应的抑
    制作用。我们建议在用Biolife Green I进行荧光PCR反应时,
    Mg2+浓度比无 Biolife Green  I 的普通 PCR 反应高出 0.5~3
    mM。
    3.  为了您的健康,请穿实验服并戴一次性手套进行操作。
    Biolife Green I, 20× in water(PCR级)