Biolife Green I, 20× in water（PCR级）产品说明书

Biolife Green I, 20×  in water（荧光定量 PCR 级染料）
产品货号：XK2017
产品规格：1 mL

储存条件
本产品 4℃避光保存，有效期见外包装。使用前，将产品室
温下解冻，并轻轻涡旋混匀，解冻后所有实验应在冰上操作。
该产品避免反复冻融。

产品介绍
Biolife Green I 效能等同于 Sybr Green I。
Biolife Green I是一种结合于dsDNA双螺旋小沟区域的
具有绿色激发光的荧光染料。 Biolife Green I 与 dsDNA结合
后荧光信号会增强 800-1000 倍，是一种常用的 qPCR 荧光
染料。该染料经济实惠、使用方便，具有高灵敏度，信噪比
高等优势，可应用于基因表达差异分析，基因芯片等。

使用方法
1.  建立如下实验体系：（仅供参考）
名 称  体 积
10×的无 Mg2+聚合酶缓冲液  5 μL
50 mM MgCl2  2.5 μL
2 mM dNTP  5 μL
20×  Biolife Green  2.5 μL
Taq DNA polymerase  1-5 units
F, R Primers  各 0.1-0.5 μM
模板 DNA  适量
dH2O  补足总体积至 50 μL
注：DNA模板的添加量通常在 100 ng 以下。因不同种类的
DNA 模板中含有的靶基因的拷贝数不同，必要时可进行梯
度稀释，确定合适的 DNA 模板添加量。cDNA 作为模板时
的添加量不要超过 PCR 反应液总体积的 10%。
2.  执行实时定量PCR 程序，采集荧光信号。
程序  温度  时间  循环
酶激活  95℃  2 min  1
变性
退火
延伸
95℃
50-60℃
72℃
5 s
45  5 s
25 s
3.  分析数据。

注意事项
1. Biolife Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功
的关键因素。染料浓度过低会使荧光信号变化降低，导致低
拷贝的样品可能无法检出，而在高浓度时又会抑制 PCR 反
应。所以一般在使用 Biolife Green 染料时应根据实际情况优
化使用浓度，反应的终浓度为 1×到 0.2×之间。
2.  提高Mg2+浓度可以降低 Biolife Green I 对PCR 反应的抑
制作用。我们建议在用Biolife Green I进行荧光PCR反应时，
Mg2+浓度比无 Biolife Green  I 的普通 PCR 反应高出 0.5~3
mM。
3.  为了您的健康，请穿实验服并戴一次性手套进行操作。
Biolife Green I, 20× in water（PCR级）