产品订购信息:

中文名称：人组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒

英文名称：Human tissue protein deacetylase (HD) ELISA kit

产品规格：96T/48T

使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中组织蛋白去乙酰化酶(HD)含量。

保存条件及有效期

1.试剂盒保存：2-8℃。

2.有效期：6个月

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。ELISA实验中有三种必要的试剂：

① 固相的抗原或抗体（用于结合到固相载体上）

② 标记的抗原或抗体（标记物）

③ 作用的底物（显色剂，用于显色）

前期准备工作：

实验前样本和试剂盒室温平行1小时，如果样本是冻存样本，应提前拿到2-8摄氏度进行解冻（不建议直接室温解冻）

准备好实验所需耗材，蒸馏水（去离子水）。

操作流程描叙：

1，  将要进行实验的版孔进行设定好，标准品5个点，每个点设定平行，需要用到10个孔，空白只需1个孔。剩下孔可以做为样本孔

2，  稀释标准，准备好5个EP管，然后在每个EP管中加入150微升标准稀释液，编上编码，分别为1，2，3，4,5，在1号管中加入150标准品，用枪头反复吹打10次左右（注意控制幅度不要过大容易产生气泡）如果有涡旋仪可以在涡旋仪上涡旋5秒左右，然后换枪头，在1号管中取150微升加入到2号管，后面过程一次类推。 稀释完，前面4个管中每管液体在150微升，5号管为300微升。浓度是从大到小。

3，  标准、样本、空白加样：标准是每个浓度点2个孔（做平行），每孔加入50微升，加样过程中注意换枪头，样本孔中每孔加入50微升，加样过程中注意换枪头，空白孔加入50微升标准稀释液或者样本稀释液。特别要说明的是，标准加样和样本加样尽量控制在15分钟内加完，如果时间拖的太长，会导致前面孔先反应后面孔才开始反应，这样数值偏差过大。加完样后盖上封板膜，至37摄氏度孵育30分钟.

4，  洗版，在孵育过程中可以将洗涤液配好，20ml30倍浓缩洗涤液用蒸馏水或者去离子水定容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗涤液（不要漫过版孔），（如果有震荡仪的话，可以讲板子放入震荡仪上5秒左右，然后静止三十秒，没有请忽略次过程）将板子在桌子上晃动5秒左右，然后静置30秒，甩干，拍板。说明：甩干过程尽量要快，1秒内就可以完成，不要慢慢倾斜倒掉液体，直接翻板甩掉液体即可。拍板过程需要在桌子上垫一层吸水纸或者滤纸，版孔朝下拍几下，拍干区别主要看吸水纸和滤纸上没有明显的水渍为完成。

5，  每孔加入50微升的酶标试剂，此处在空白孔中不需要加（空白孔为空），孵育30分钟。

6，  洗版同步骤4

7，  显色，先每孔中加入50微升的显色A液，然后每孔中加入50微升显色B液。避光37摄氏度显色15分钟

8，  终止，每孔加入50微升的终止液，注意，加完终止液必须在15分钟内读数，超过时间读数无效。在规定时间内读数都是有效的。

至此，整个实验结束。