产品订购信息:

中文名称：人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒

英文名称：Human pepsin (Pepsin) ELISA Kit

产品规格：96T/48T

人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒用途：
本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中蛋白酶(Pepsin)的含量。

实验原理：

凡在本公司购买人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒，可提供免费代测服务，视样本数量而定出结伦，一般一周内出检测结果！

人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒实验材料与试剂配制：

1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。

2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。

混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。

3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。

样品收集、处理及保存：

1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104

-106

/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或

者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。

3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上

清。

5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。

6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000

rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。

7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标

本尽可能的不要使用溶血或血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解

冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作流程图：

人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒注意事项：

1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。

2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免 孔与 一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响

实验的准确性以及重复性。

3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。

4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。

5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。

6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商联系，

如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。