检测原理

试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人ICAM-2/CD102抗体的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)的存在与否。

样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

粪便样本

    粪便标本的检测对判断疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常成分的粪便，对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查阿米巴滋养体应于排便后立即检查，从有脓血和稀软处取材，保温送检。查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分，孵化毛蚴时至少留取30g粪便，且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法)，试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂，维生素C等。所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕，以防止有形成分受消化酶及pH的破坏,来不及检测的，应及时用PBS进行缓冲处理，离心去上清保存。

尽量采集干的粪便，粪便过稀会较难处理且降低检测的准确性。采集的重量应大于 50 mg，将粪便用 PBS 洗 3 次（最终粪便质量：PBS 体积=1:9），用超声粉碎（或捣碎）后于 5000×g 离心 10 分钟，取上清检测。

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

自备物品

1.  酶标仪（450nm）

2.  高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.  37℃恒温箱

操作注意事项

1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.  预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的 检测效果。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒性能

1.  准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15，说明试验结果有效。

2.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

4.  贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

5.  有效期：6个月

本公司试剂盒可检测人、猴、猪、兔、大鼠、小鼠、豚鼠、牛、鸡、鸭、犬、羊、植物等类型；适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种标本类型。可检测白介素、紧张素、衣原体、趋化因子等各种指标。每个指标需提供100微升样品，如做复孔则需要200微升。标本离心处理后可通过泡沫箱加干冰或者冰袋寄送我公司。本公司提供的试剂盒均为科研产品，仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验。

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